大额牛精液低温冷冻保存方法

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	大额牛精液低温冷冻保存方法
	司维; 苏雷; 季维智
	2004-03-12
专利权人	中国科学院昆明动物研究所
公开日期	2005-01-05
授权国家	中国
专利类型	发明
摘要	本发明涉及一种大额牛精液低温冷冻保存方法,属生物技术领域。本发明利用滴冻法对大额牛精液进行冷冻保存。冷冻液的配方为卵黄15％-20％v/v、甘油3％-6％v/v、乳糖1.0M-1.5M和蔗糖1.0M-1.5M；防冻液与精液稀释比例为1∶10、稀释后的精液放置在室温下平衡1小时,再转移到4℃冰箱中平衡3小时；冷冻精液的品质判定指标为：解冻复速率不低于70％；精子体外存活时间在解冻后放入37℃、5％CO2培养箱中进行培养1小时后,运动度不小于30％；金黄地鼠裸卵穿透率不低于38％；精液在50mOsm/kg的低渗溶液中,38℃的5％CO2培养相中培养1小时,精子肿胀率不低于39％。本发明具有实用且效果可靠,提供的大额牛冷冻精液品质的评定方法和判定指标科学、规范等优点。
主权项	1、大额牛精液低温冷冻保存方法,包括精液的采集、检查、防冻液配置、精液的稀释、精液的冷冻和保存、冷冻精液的解冻、冷冻精液的品质评定步骤,其特征在于： (1)冷冻液的配方为卵黄15％-20％v/v,甘油3％-6％v/v,乳糖1.0M-1.5M,蔗糖1.0M-1.5M,其余为超纯水； (2)精液的稀释为将冷冻液预热到37℃,按防冻液∶精液稀为1∶10进行稀释, 稀释后的精液放置在室温下平衡1小时,再转移到4℃冰箱中平衡3小时； (3)精液的冷冻采用滴冻法,即在干冰上或在预冷到-80℃左右的铜板上滴0.2m 的精液,当滴在干冰上或铜板上的精液滴硬化且表面变光亮5-7分钟后,放入液氮中保存； (4)冷冻精液的品质判定指标为：解冻复速率不低于70％；精子体外存活时间在解冻后放入37℃、5％CO2培养箱中进行培养1小时后,运动度不小于30％；金黄地鼠裸卵穿透率不低于38％；精液在50mOsm/kg的低渗溶液中,38℃的5％CO2培养相中培养1小时,精子肿胀率不低于39％。
授权日期	2008-04-23
申请日期	2004
专利号	ZL200410022018.8
语种	中文
申请号	200410022018.8
PCT属性	是
专利代理人	昆明大百科专利事务所
文献类型	专利
条目标识符	http://ir.kiz.ac.cn/handle/152453/1765
专题	生殖与发育生物学
作者单位	中国科学院昆明动物研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	司维,苏雷,季维智. 大额牛精液低温冷冻保存方法. ZL200410022018.8[P]. 2004-03-12.

条目包含的文件
文件名称/大小	文献类型	版本类型	开放类型	使用许可
200410022018.pdf（236KB）	专利		开放获取	CC BY-NC-SA	请求全文