KIZ OpenIR  > 科研部门  > 分子免疫药理学(郑永唐)
HIV-1 C亚型gp120重组腺病毒载体的构建及gp120负载人树突状细胞疫苗的初步研究
其他题名Construction of Replication-deficient Recombinant Adenoviruses Containing HIV-1 Subtype C gp120 and Preliminary Study on Dendritic Cell Vaccine Loaded with gp120
白雪
学位类型硕士
导师郑永唐
2009-07-02
学位授予单位中国科学院研究生院
学位授予地点北京
关键词Hiv-1 C亚型 Gp120 腺病毒 Dc
摘要获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是一种由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的,以全身免疫系统受到严重损害为特征的传染性疾病。从目前HIV-1的流行趋势来看,HIV-1 C亚型已经成为全球最主要的流行株之一,因此,针对HIV-1 C亚型的疫苗设计颇为重要。gp120作为HIV-1的包膜糖蛋白,能够诱导广泛的中和抗体反应,中和进入机体的病毒粒子,阻止病毒早期感染,所以本实验选取HIV-1 C亚型密码子优化的gp120作为免疫原进行研究。目前的疫苗研究中,腺病毒载体是较理想的病毒载体之一,具有安全性好、外源基因容纳量大、感染效率高、操作简便等优点。我们以复制缺陷型腺病毒为载体,构建了表达HIV-1 C亚型密码子优化的gp120的重组腺病毒vAd-gp120,经Western Blot方法检测到了gp120蛋白的表达。树突状细胞(DC)是已知最强的抗原呈递细胞(APC),也是目前发现的唯一能够刺激初始型T细胞增殖的细胞。经抗原致敏的DC可通过MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ途径递呈抗原,并激活T细胞,从而激发体内的体液免疫和特异性细胞免疫反应。我们利用Amaxa系统将HIV-1 C亚型gp120基因转入人外周血单核细胞来源的DC,构建了以DC为载体的治疗性疫苗,并对其功能进行初步研究,发现负载gp120的DC能够显著刺激淋巴细胞的增殖、增强CD8T细胞表面活化分子CD25的表达以及促进CD8T细胞分泌++IFN-γ,为下一步DC治疗性疫苗的体内研究奠定了基础。
其他摘要Acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) caused by human immunodeficiency virus( HIV) is characterized by serious damage to the immune system. Within this current HIV pandemic, HIV-1 subtype C (HIV-1 C) is the most prevalent subtype. The urgency of designing an effective and safe HIV-1 C vacccine to protect people from HIV/AIDS is absolutely important. It has been shown that the structural env gene, gp120, could be the primary target for HIV-1 vaccine research. In this study, to elicit broadly neutralizing antibodies against HIV-1, HIV-1 C optimized codon usage gp120 was selected as a crucial immunogen. It was constructed into a replication-deficient recombinant adenoviruses vectors Adeasy-1, and its expression in 293 cells was successfully detected by Western Blot. Dendritic cells (DCs), the most potent APCs, have a pivotal role in the initiation and maintenance of immune responses agaist viruses and have been found to process proteins through MHC classⅠcross-presentation pathways for stimulation of CD8+ T cells, and MHC classpathways for activation of CD4Ⅱ+ T cells. Thus, a therapeutic vaccine, in this study, was made of monocyte-derived DCs transfected with gp120 gene. T cell proliferation and production of CD25 and IFN-γ in CD8+ T cells were significantly increased in vitro by DC vaccine stimulation. The further works will focus on fuctions of DC vaccine loaded with gp120 in vivo.
语种中文
文献类型学位论文
条目标识符http://ir.kiz.ac.cn/handle/152453/6482
专题科研部门_分子免疫药理学(郑永唐)
推荐引用方式
GB/T 7714
白雪. HIV-1 C亚型gp120重组腺病毒载体的构建及gp120负载人树突状细胞疫苗的初步研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院,2009.
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