姚虻唾液腺抗血栓活性物质 tablysin2的原核表达及活性研究
高丽
学位类型硕士
导师赖仞
2010-05-29
学位授予单位中国科学院研究生院
学位授予地点北京
关键词姚虻 Tablysin2 表达纤溶酶活性 血小板聚集抑制活性
摘要吸血节肢动物在长期的环境胁迫下,进化出一套有利于其完成吸血活动的分子机制。吸血节肢动物的唾液腺可分泌多种有助于完成吸血过程的活性物质,其中包括血小板聚集抑制分子、抗凝血物质、溶栓物质、血管扩张分子、血管收缩抑制分子及其他一些相互作用分子。 虻虫作为传统的抗血栓中药具有具有悠久的应用历史。早在两千多年前《神农本草经》中就有“虻虫,性苦,微寒,主逐淤血,破血积、通利血脉及九窍”这样的记载。但是目前关于牛虻唾液腺抗血栓活性物质的研究很少,因此我们研究了一种牛虻——姚虻的唾液腺作为研究材料,希望从中寻找具有药用价值的抗血栓活性物质。我们还希望能利用微生物发酵工程对其进行小规模生产,以检测这些活性物质的体内活性,毒性等指标,为大规模的工厂化生产及临床应用奠定基础。 我们成功地从姚虻唾液腺cDNA文库中筛选到了抗血栓活性物质tablysin2,并利用大肠杆菌pET表达系统成功地对其进行了表达,获得了具有纤溶酶活性和血小板聚集抑制活性的tablysin2。这一工作进展解决了姚虻唾液腺资源紧缺对研究tablysin2的限制,为tablysin2的体内研究及临床应用创造了条件。此外,我们通过动物实验,初步断定tablysin2在18 ug/ml的剂量范围内不会引起组织出血。
其他摘要on the salivary extraction of horsefly so far. So we chose horseflies——Tabancus yao Macquart as our material.We worked on tabancus yao Macquart to find some candidates for antithrombotic medicine. In order to get materials to study the functions and toxicity of the antithrombotic substances from Tabancus yao Macquart salivary in vivo, we expressed some of the antithrombotic substances at laboratory scale. We screened the cDNA library of tabancus yao Macquart salivary. And the whole length sequence of tablysin2, a fibrinogenase of tabancus yao Macquart salivary, was found. Then we expressed it with the pET expression system. And tablysin2 with fibrinogen hydrolytic activity and platelet aggregation inhibitory activity was produced. This progress lifted the limitation of the deficiency in resources. And it made the study of tablysin2 in vivo and the clinical application of tablysin2 possible. Additionally, we studied the bleeding side effect of tablysin2 and found that tablysin2 didn’t cause bleeding under the concentration of 18ug/ml.
语种中文
文献类型学位论文
条目标识符http://ir.kiz.ac.cn/handle/152453/6505
专题科研部门_天然药物功能蛋白质学科组(赖仞)
推荐引用方式
GB/T 7714
高丽. 姚虻唾液腺抗血栓活性物质 tablysin2的原核表达及活性研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院,2010.
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