KMS KUNMING INSTITUTE OF ZOOLOGY.CAS
| 小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备与初步应用 | |
| 龙云凤1; 周晓黎2; 杨俊兴3; 王琼4; 祝贺2; 叶玲玲2; 董俊2; 吕建强3; 王金萍5; 陈朝银1; 花群义3; 杨仕标5; 尹尚莲2; 徐维佳*2; 艾军*2; ajun915@yahoo.com; chaoyinchen@163.com | |
| 2012 | |
| 发表期刊 | 畜牧兽医学报
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| 卷号 | 43期号:4页码:588-596 |
| 合作性质 | 其它 |
| 摘要 | 针对小反刍兽疫病毒核蛋白制备特异性的单克隆抗体,并对其进行生物学特性鉴定和初步应用。以纯化的Bacmid-PPRV-N重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的致敏脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在PEG作用下融合,获得单克隆抗体,并通过染色体技术等方法研究其生物学特性,将其作为竞争单抗,Bacmid-PPRV-N重组蛋白作为检测抗原建立竞争ELISA检测方法。结果表明:经克隆和间接ELISA筛选,获得了2株能稳定分泌抗小反刍兽疫病毒N蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为5B11和3H10-3B8。生物学特性鉴定试验表明:5B11和3H10-3B8抗体类型和亚类均为IgG2b;5B11单抗腹水的效价达1∶819 200,3H10-3B8达1∶12 800;血清学试验证明2株单抗均能与Bacmid-PPRV-N重组蛋白抗原结合,具有高度的特异性;相加ELISA试验结果显示,5B11和3H10-3B8 2株单克隆抗体分别识别N蛋白上不同的抗原位点;2株杂交瘤细胞的染色体均为99～104。应用建立的c-ELISA检测方法对222份血清样品进行PPRV抗体的检测,与参考试剂盒比较得到98.20%的符合率。本研究获得了2株能稳定分泌抗PPRV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以单抗5B11作为竞争抗体建立了PPRV的c-ELISA检测方法。 |
| 关键词 | 小反刍兽疫 单克隆抗体 生物学特性 竞争ｅｌｉｓａ |
| 资助者 | 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 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| 收录类别 | 其他 |
| 语种 | 中文 |
| 资助者 | 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100501);国家质检总局科技计划项目(2007IK025). ; 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| 文献类型 | 期刊论文 |
| 条目标识符 | http://ir.kiz.ac.cn/handle/152453/7486 |
| 专题 | 中国科学院昆明灵长类研究中心 |
| 通讯作者 | ajun915@yahoo.com; chaoyinchen@163.com |
| 作者单位 | 1.昆明理工大学;昆明650500 2.云南出入境检验检疫局;昆明650228 3.深圳出入境检验检疫局;深圳518045 4.中国科学院昆明动物研究所;昆明650223 5.云南省畜牧兽医科学院;昆明650224 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 龙云凤,周晓黎,杨俊兴,等. 小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备与初步应用[J]. 畜牧兽医学报,2012,43(4):588-596. |
| APA | 龙云凤.,周晓黎.,杨俊兴.,王琼.,祝贺.,...&chaoyinchen@163.com.(2012).小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备与初步应用.畜牧兽医学报,43(4),588-596. |
| MLA | 龙云凤,et al."小反刍兽疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备与初步应用".畜牧兽医学报 43.4(2012):588-596. |
| 条目包含的文件 | ||||||
| 文件名称/大小 | 文献类型 | 版本类型 | 开放类型 | 使用许可 | ||
| 2013061802.pdf（613KB） | 期刊论文 | 出版稿 | 开放获取 | CC BY-NC-SA | 请求全文 | |
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